96 試験 高複製性 カナミシン検出のためのELISA試験キット

カナマイシン ELISA テスト キット

製品説明

レーゲン^TMカナマイシン ELISA テストキットは,肉/肝臓/腎臓,細胞リサート,尿,血清,牛乳におけるカナマイシンの定量分析のための競争力のある酵素免疫検査です.

このキットの特徴は以下の通りです

• 高回帰率 (>80%),迅速 (10-40分),費用対効果の高い抽出方法

• 検知限界は0.2 ng/g

• 複製性が高い

• 迅速なELISA検査 (サンプル数に関係なく1時間未満)

手続きの概要

この方法は,競争的な色素測定 ELISA 検査に基づいています. カナミシン-BSA はプレート井戸にコーティングされています. 分析中に,サンプルとカンナミシン抗体 (抗体#1) とHRP結合抗体 (HRP結合抗体#2) が,発泡のための井戸に追加されます.カナミシン抗体,二次抗体,ペロキシダース酵素でタグ付けプレート井戸にコーティングされた薬剤に複合された主要な抗体を標的とするHRP基質 (TMB) を加えた後に得られる色濃度は,サンプル内のカンナミシン残留物濃度と逆関係があります.

セットの内容,保管期間,保存期間

レーゲン^TMカナマイシン ELISA テストキットは,96の決定または42個のサンプルを2回で検査する能力があります (標準では12の井戸を想定します).使用していないマイクロウェルを紙袋に戻し,元のパッケージに付いた乾燥剤で再封印します.セットを 2- 8°C に保管します. セットが適切に保管されている場合,保存期間は12ヶ月です.

セットを1ヶ月以上使用するつもりでない場合は,カンナミシンスタンダードストック,カンナミシン抗体#1,HRP結合抗体#2を -20°Cまたは冷蔵庫に保管してください.

感度 (検出限界)

特殊性 (交叉反応性)

必要な材料はキットには含まれていません.

• マイクロタイタープレートリーダー (450nm)

• 組織ミキサー (例えばオムニ組織マスターホモゲナイザー)

• 渦巻きミキサー (例えば,VWRのジーニー渦巻きミキサー)

• 10, 20, 100 と 1000 IU のパイペット

• 多チャンネルパイペット: 50〜300L (オプション)

警告 と 予防 策

• 標準にはカナミシンが含まれています.
• 使用期限が切れた後には使用しないでください.
• 効用期限内に同じ部品番号を持つ成分を除き,異なるキットまたはロットからの試料を混ぜてはならない.抗体とプラットはキットとロット特異である.
• 実験室の温度を 20°~25°C (68°~77°F) に保ちましょう.過度の冷却,加熱,蒸発を引き起こす可能性があるため,空気口の下またはその近くで検査を行わないでください.また,直接日光にさらされて検査を行わないこと過剰な熱と蒸発を引き起こす可能性があります.冷たいベンチトップは,保育中に,紙タオルや他の隔熱材料のいくつかの層を試料板の下に置くことで避けるべきです..
• 水質が非常に重要なので,蒸留された水や離子化された水のみを使用してください.
• 試料や試料を空のマイクロタイタープレートにパイペッティングするとき,パイペットの先端を井戸の下角に配置し,プラスチックに接触する.
• 試料皿の発育時間は,できるだけ正確に予定されるべきです.試料皿に基準を追加する際には一貫してください.まず基準を追加し,次にサンプルを追加してください.
• 標準曲線を損なうリスクを最小限に抑えるため,低濃度から高濃度までの順序でのみプレートに標準を加える.
• 安定性を保つために,必ず乾燥剤で封印された袋にプレートを冷蔵してください.プレートに凝縮が形成されないようにして,パッケージ内にいる間,室温 (20°C/ 68°F) に均衡させてください..

標本が適切に保管されていることを確認します. 一般的に,標本は2〜4°Cで1〜2日以上冷蔵されるべきです. 長期保存が必要な場合は,標本を最低20°Cに冷凍してください.凍結したサンプルは,使用前に室温 (20°C~25°C/68°F~77°F) または冷蔵庫で解凍できます..

• 1×サンプル稀释剤の調製:10×サンプル稀释剤の1ボリュームを9ボリュームの蒸留水と混ぜる.
• 準備する 1×サンプル エクスト・バッファ:10×サンプルエクストのバッファを1ボリュームと9ボリュームの蒸留水を混ぜる.

細胞リサート

• 細胞リサート100IUを取り,1×サンプルの稀释剤バッファ900IUを加え,よく混ぜます.

• 4000 x g で 5 分間遠心分離する.

• 検査のために,穴1口に上位剤50IUを採取する.

注記: 希釈因数 10

エビ/魚/肉/肝臓/腎臓

• 均質化されたサンプルの1.0gに,1.×サンプルの長さのバッファの4.0mLを加える.

• 渦巻きミキサーでサンプルを1分 渦巻きします

• 4000 x g で 5 分間サンプルを遠心分離する.

• 慎重に新しいチューブに上層の200uLを移動,1 を加える.375mL 1Xサンプル稀释剤と25uL サンプルバランスバッファ,渦 30秒間.

• 試験のために 1 井戸あたり 50uL を使用する.

注記: 希釈因数 40

尿/血清

• 尿または血清サンプル50uLを取り,1Xサンプル稀释剤の1.2mLを加え,よく混ぜます.

• 4000 x g で 5 分間遠心分離する.

• 試験用には,穴1口あたり50uLの超浮生剤を採取する.

注記: 希釈因数 25

牛乳

• 100uLのミルクサンプルを遠心分離管に加え,900uLの1Xのサンプル稀释剤を加える.
• 30秒間 猛烈に渦巻く
• 4000 x g で 10 分 遠心分離する
• 検査のために,上位物質のサンプル50uLを使用する.

注記: 希釈因数:10

カナミシン ELISA テストキット プロトコル

反応剤の調製

重要: すべての試料は使用前に室温にする必要があります. 1 〜 2 時間20 25°C / 68 ̇ 77°警告と注意事項 セクションをご覧ください.ページ3.溶液はELISA試験直前準備する必要があります.すべての試料は使用前に軽く逆転または渦巻きで混合する必要があります.実行されている井戸の数に必要なボリュームを準備してください.試料を原料のチューブ/ボトルに戻さない試料を処理する際に使い捨て用貯水池を使用することは,汚染のリスクを最小限に抑えることができ,推奨されます.

• 1X 洗剤の調製

20X洗浄溶液の 1 巻を 19 巻の蒸留水と混ぜます.

ELISA試験プロトコル

使用する個々のストライプとアリクォート反応剤を次の例でラベルする.

• 各カンナミシン標準の 50 IU を 2 枚ずつ異なる井戸に加える (低濃度から高濃度までの順序でのみ基準をプレートに加える).

• 各サンプルから50Lを2回分に異なるサンプルプーンに追加する.

• 各井戸にHRP結合Ab#2の50IUとカンナミシン抗体#1の50IUを加える.プレートを手動で30秒間軽く揺さぶることでよく混ぜる.

• 室温で30分間保育します (20°C/ 68°F).発育中に直接太陽光や冷たいベンチを避けてください.発育中にマイクロタイタープレートを覆うことが推奨されます).

• 1X洗剤の250Lで4回洗います.最後の洗浄後,皿を逆向きに洗い,紙タオルで薄く乾燥させましょう. (皿を洗った直後に次のステップを実行します.作業段階の間には,プレートが空気中に乾燥させてはならない).

• 100LのTMB基質を加える. 基質を加えた直後に反応をタイムする. 溶液を混ぜ, 30秒間手動でプレートを柔らかく揺さぶる.潜在的汚染を避けるため,原容器に戻さないでください.色を呈する材料溶液は劣化を示し,廃棄する必要があります.発育中にマイクロタイタープレートを覆うことが推奨されます).

• 室温で15分間保育した後 (20 25°C / 68 ̇ 77°F について酵素反応を停止するために,ストップバッファの100IUを追加します.

• 450 nm 波長のプレートリーダーでストップバッファを追加した後,できるだけ早くプレートを読み取ります (読み取れる前に,プレートの底部に毛糸のない拭き用紙を塗り,水分や指紋が測定に干渉しないようにします).

カナミシン濃度計算

標準曲線は,各基準基準から得られた平均相対吸収量 (%) を対数曲線でng/mLの濃度と比較してグラフ化することによって作ることができる.

相対吸収率 (%) =吸収量ゼロ標準またはサンプル x 100

標準曲線から試験薬の対応濃度 (ng/mL) を決定するために,各サンプルに対する平均相対吸収値を使用する.

次の図は,典型的なクロラムフェニコル標準曲線です.